Исследование ретикулоцитов

Содержание

Ретикулоциты: что это, нормы для детей и взрослых, высокие и низкие, роль в огранизме

Исследование ретикулоцитов

В общем анализе крови нередко можно встретить и такое обозначение клеток, как RET — ретикулоциты. В полном смысле слова клетками они не являются, поскольку не имеют ядра, ровно, как и зрелые эритроциты.

Между тем, определение этих форм не входит в перечень обязательных показателей гематологического исследования. Если врачу нужно, он отдельно подчеркивает интересующие его параметры.

Разумеется, людям, которым доводилось сдавать подобный анализ,  хочется узнать: что это за клетки такие – ретикулоциты, и почему к ним относятся так неоднозначно.

Кто они и сколько их?

Ретикулоциты – «новоиспеченные» эритроциты, только-только покинувшие костный мозг.

Норма ретикулоцитов в периферической крови взрослого человека едва превышает 1% (по данным разных авторов от 0,8 — 1,3 до 0,2 — 2%). У детей только-только появившихся на свет нормой может быть и 10%, но по мере роста и развития малыша показатели начинают снижаться и уже к двум неделям жизни максимально приближаются к нормальным значениям взрослых людей.

Вообще, эритропоэз новорожденных – это отдельная тема: взятый анализ через 12 часов после рождения показывает заметное увеличение уровня гемоглобина (до 200 г/л), эритроцитов (до 6,0 х 1012/л и выше) и ретикулоцитов. Такая картина крови наблюдается несколько дней, затем данные показатели начинают падать, что связано со снижением выработки эритропоэтина.

Через две недели – месяц продукция эритропоэтина вновь увеличивается, что приводит к повышению уровня ретикулоцитов и эритропоэз нормализуется (у полугодовалого ребенка нормы уже мало отличаются от взрослых).

В этой связи хотелось бы обратить внимание читателя на обозначение единиц измерения количества ретикулоцитов, содержание их может выражаться и в промилле, тогда цифры увеличатся в 10 раз.

Таблица: нормы ретикулоцитов по возрастам

Ед. измеренияДо года1 – 6 лет6 – 12 лет12 – 16 летВзрослые мужчиныВзрослые женщины
Процент (%)0,3 – 1,50,3 – 1,20,2 – 1,20,2 – 1,10,8 – 1,20,2 – 2
Промилле (‰)3 – 153 – 122 – 122 – 118 – 122 – 20

Однако возраст «до года» включает разные, очень ответственные для организма ребенка периоды. Кроме этого, нелишним будет учесть и мнение разных авторов, рассматривающих другие варианты, где нормы у детей расписаны буквально по дням и месяцам и, следовательно, несколько отличаются от предыдущих значений. Есть заметная разница и в нормах взрослых.

Возраст по дням, месяцам, годамКоличество ретикулоцитов в промилле
До 14 дней1,5 – 15
От двух недель до 1 месяца4,5 – 14
От 1 до 2 месяцев4,5 – 21
От двух месяцев до полугода2,5 – 9
От 6 месяцев до 2 лет2 – 10
От 2 до 6 лет2 – 7
От 6 до 12 лет2 – 13
Люди старше 12 лет женского пола1,2 – 20,5
Люди старше 12 лет мужского пола2,4 – 17

Пациенту самому выбирать, которой таблице верить, хотя в разных источниках можно найти еще несколько штук, однако в сомнительных случаях не мешало бы спросить в лаборатории, каким методом производился подсчет (микроскопия или автоматический анализатор) и какие референтные значения использует данная лаборатория.

Почему их так мало и какова их роль?

Родоначальником красных кровяных телец эритроидного ряда является не содержащая гемоглобин, но еще имеющая ядро, как и положено настоящей клетке, клетка  – эритробласт, которая в нормальных условиях трансформируется в базофильный эритробласт  (пронормобласт, где уже намечаются первые признаки гемоглобинизации (полихроматофильная стадия).

Если с кроветворением все в порядке и условия соответствуют физиологическим, то будущий эритроцит проходит стадии пронормобласта и нормобласта (он представляет собой конечную стадию развития эритроцита, когда в нем еще присутствует ядро).

При дальнейшем созревании клетки происходит инволюция ядра и следующий предшественник — полихроматофильный нормоцит, его все-таки теряет, превращаясь в молодой нормоцит, называемый ретикулоцитом.

Ретикулоциты ядра уже не имеют, зато содержат гемоглобин и обладают способностью переноса кислорода и углекислого газа.

Ретикулоциты входят в число показателей общего анализа крови, однако их поиском занимаются только в тех случаях, когда возникает необходимость изучения интенсивности эритропоэза.

Подсчет количества эритроцитов производится в 1000 эритроцитов и ставит своей задачей определение скорости выработки красных кровяных телец костным мозгом: при ускоренной продукции – количество ретикулоцитов повышается, при угнетении – падает вниз.

Резко ускоренный эритропоэз может приводить к тому, что из костного мозга будут выходить в большем, чем нужно, количестве не только ретикулоциты, но и их предшественники – нормобласты. Однако почему же их нельзя посчитать как другие клетки, в ходе клинического анализа крови?

Они требуют отдельной окраски

После потери ядра эритроциты воспринимают только кислые красители, и световая микроскопия не обнаруживает у них никаких внутриклеточных структур, позволяющих отнести форменные элементы к молодым или зрелым видам.

Однако найти ретикулоциты можно, применив специальные методы окраски.

Суправитальная окраска бриллианткрезиловым синим или акридиновым оранжевым, выявляющая базофильную субстанцию — гранулярные или нитевидные образования, помогает вычленить в мазке из общей массы (1000 клеток) красных кровяных телец молодые формы – ретикулоциты.

Между тем, имея в цитоплазме свойственную ретикулоцитам сетчатую субстанцию, которая определяет название клеток (substantia reticulofilamentosa), не все они «одинаковы с лица», поэтому их разделяют на 5 групп, каждая из которых имеет свои особенности расположения базофильного вещества (БВ):

  1. Ядерные ретикулоциты, получившее свое название из-за расположения БВ в виде венчика или ядра.
  2. Клубкообразные клетки – БВ напоминает глыбки или клубок.
  3. Полносетчатые ретикулоциты – базофильное вещество представлено густой сеткой;
  4. Неполносетчатые формы — БВ осталось как отдельные нити.
  5. Пылевидные ретикулоциты — мелкие зернышки в клетках и есть базофильная субстанция.

Короткосрочная «молодость»

В периферической крови здоровых взрослых людей циркулирует не более 1%  молодых эритроцитов, которые, в основном, относятся к 4 и 5 группе (83%). Ретикулоцитов 3 и 4 группы значительно меньше, вместе они составляют около 18%, а 1 группа  (ядерные клетки) вообще появляются только в случае усиленной регенерации.

Эритроциты пребывают в «молодом возрасте» и называются ретикулоцитами недолго: 30 – 40 часов отведенного срока они не оставляют строму костного мозга, образуя там некоторый резерв красной крови, а после выхода, который регулируется, в основном, гуморально гликопротеиновым гормоном эритропоэтином, 35 – 45 часов свободно путешествуют по кровеносным сосудам. В периферической крови ретикулоциты окончательно прощаются с «юностью» — теряет ретикулум и отправляется выполнять основные функции взрослой клетки, которую, как указывалось выше, клеткой назвать трудно – ядра-то она не имеет («дериваты клеток»).

Нужен подсчет ретикулоцитов!

При определенных обстоятельствах продукция эритроцитов в костном мозге усиливается, следовательно, выход молодых форм в кровяное русло повышается или, наоборот, угнетение кроветворения будет затормаживать выход ретикулоцитов и тогда их количество в крови будет понижено. Попытка оценить эффективность эритропоэза, как правило, начинается с подсчета свежевышедших из костного мозга красных кровяных телец.

Использовать в клиническом анализе обозначение RET заставляют и подозрения об усиленном разрушении эритроцитов в крови (гемолиз).

Однако, выясняя причину разрушения клеток, встает вопрос: как костный мозг реагирует на подобные события, старается ли он возместить потери молодыми формами или остается безучастным? Кроме этого, повышенные (или пониженные) молодые эритроциты могут информировать о поведении костного мозга и при других обстоятельствах:

  • Применение лекарственных средств, влияющих на работу главного кроветворного органа (препараты железа, витаминотерапия В12 и фолиевой кислотой);
  • Лечение эритропоэтином, который, как известно, контролирует выход ретикулоцитов из костного мозга);
  • Состояние костного мозга после трансплантации донорского органа.

Ретикулоциты повышены – что это значит?

Повышенные значения содержания молодых форм в популяции клеток эритроцитарного звена могут свидетельствовать о наличии различных патологических процессов и реакции костного мозга на их присутствие:

  1. Вряд ли кровопотеря, особенно массивная, не заставит интенсивно работать здоровый мозг – ведь убытки нужно как можно скорее восполнять, поэтому количество ретикулоцитов может быть повышено до 10 – 12 % (100 — 120‰ или 100 – 120 ретикулоцитов на 1000 эритроцитов – 1/10 часть).
  2. Разрушение красных кровяных телец по причине попадания гемолитических ядов или в силу других обстоятельств также не оставит «равнодушным» костный мозг — усиленный распад зрелых эритроцитов всенепременно повысит долю молодых форм (иногда эта доля может достигать 50%).
  3. Не проходит незамеченным и такое серьезное заболевание как гемолитическая анемия, приводящая к повышению RET аж на 300%, то есть, уже не ретикулоциты нужно искать в эритроцитах, а наоборот, поскольку все формы будут молодыми, а взрослые успеют разрушиться.
  4. Сопровождается ретикулоцитозом и другая гематологическая патология (полицитемия, талассемия), а также метастазы в костный мозг неоплазий различной локализации.
  5. Повышены значения ретикулоцитов будут в случае острой гипоксии (кислородное голодание) в силу различных обстоятельств, которые могут преследовать человека от момента рождения до старости.
  6. Причиной повышенных количеств молодых клеток могут стать такие инфекции, как малярия.
  7. Ретикулоцитоз наблюдается при эффективном лечении препаратами железа при ЖДА (через 1-2 недели), возможен скачок до 200%  (ретикулоцитарный криз) приблизительно через неделю от начала терапевтических мероприятий в случае В12-фолиеводефицитной анемии.

Мало или вовсе отсутствуют

Падение уровня ретикулоцитов наблюдается при угнетении эритроцитарного ростка кроветворения и снижении продукции полноценных эритроцитов по разным причинам, из которых можно выделить:

  • Апластическую анемию, при которой страдают все линии кроветворения;
  • Заболевания почек, тормозящие синтез эритропоэтина, необходимого для регуляции выхода молодых клеток из костного мозга;
  • Аутоиммунные гематологические заболевания;
  • Недостаток витамина В12 и фолиевой кислоты, который весьма негативно влияет на функцию костного мозга, поскольку нужен для созревания клеток. В данном случае развитие останавливается на уровне эритробласта:  клетки больших размеров, ломкие, поэтому не пластичные, не обладающие способностью просачиваться в узкие капилляры (мегалобластная анемия);
  • Алкоголизм (какое уж тут обновление крови?);
  • Микседему;
  • Метастазы новообразований в костную систему.

В заключение

Поиск и подсчет ретикулоцитов производится в 1000 эритроцитов, поэтому относится к общему анализу крови.

Если у человека все нормально, то теряется всякий смысл производить отдельную окраску и искать молодые формы, которые в подобных случаях никакой информации не несут.

Другое дело, если появляются подозрения, что с эритроцитарной линией что-то не так — тогда данные клетки могут в некоторой степени и прояснить ситуацию.

Между тем, в иных случаях, воспринимая это исследование, как отдельное, люди спрашивают, как подготовиться к анализу, чтобы получить достоверный результат.

Традиционно ОАК сдают натощак, для ретикулоцитов и это не принципиально, поэтому можно не беспокоиться.

К тому же, если для анализа взята венозная кровь или тест производится автоматическим анализатором высокого класса, то и посещать лабораторию второй раз не придется. Все будет отмечено в общем анализе крови.

Вывести все публикации с меткой:

Источник: http://sosudinfo.ru/krov/retikulocity/

Что показывают ретикулоциты и какое у них обозначение в анализе крови

Исследование ретикулоцитов

Клетки ретикулоциты при здоровом состоянии организма человека, присутствуют в малых количествах. Основной процент ретикулоцитов в костном мозге человека преобразуются в эритроциты. Весь этот процесс превращения занимает не более 2 дней. Регулирует это преобразование гормон эритропоэтин.

В анализах ретикулоцит обозначается транскрипцией RTC, на латинском языке — Reticulocytes.

RTC (ретикулоциты) выявляет работу костного мозга, а также отмечает уровень выработки в нем эритроцитов. Нормобласты также преобразовываются в эритроциты.

Что это такое ретикулоциты и какую функцию в организме они выполняют?

Это клетки, не имеющие ядра синеватого или розового оттенка. Для ретикулоцитов есть ярко выраженные внутриклеточные структуры, что отличает их от эритроцитов.

Данные образования — это остатки клетки РНК, митохондрий и выглядят в виде нитей или же гранул. Чем больше растет в крови показатель красных тел, тем выше уровень ретикулоцитов.

И наоборот — чем меньше образовывается красных тел, тем ниже уровень этих молекул.

Предшественники эритроцитов (ретикулоциты)

Они начинают свой процесс образования из клеток нормобластов, и по истечении 48 часов эти молекулы становятся эритроцитами (незрелыми) и попадают в кровь.

Под воздействием гормона (эритропоэтин), который вырабатывается в организме при помощи почек, эритроциты из незрелых преобразовываются в зрелые эритроциты.

При активной выработке эритроцитов в крови могут быть обнаружены нормобласты, которые есть молекулярными предшественниками клеток RTC.

Функции ретикулоцитов, как и эритроцитов — это перенос кислорода.

Какая норма для детского и взрослого возраста?

Показатель уровня ретикулоцитов в крови человека меняется в зависимости от возраста. У новорожденных детей уровень значительно выше, чем показатель у взрослого человека.

До 12 лет коэффициент ретикулоцитов у мальчиков такой же, как и у девочек.

По мере взросления девочек и с моментом наступления у них менструального цикла, появляются различия в уровне ретикулоцита. Это связано с потерей объема крови при менструальном цикле.

У взрослых мужчин показатели нормы в промилле — 8 — 12, а у представительниц прекрасного пола — 2 — 20. RTC при исследовании анализов измеряют в процентах к наличию в крови эритроцитов.

В таблице отмечены показатели нормы в процентном соотношении и в промилле:

ВозрастНорма в %Норма в промилле
новорожденный ребенок до 14 дней0,15% -1,5%1,5 – 15
от 14 дней – до 60 календарных дней0,45% -2,1%4,5 – 21
от 60 дней – до 150 дней0,25% -0,9%2,5 – 9
от 180 дней – до 1 календарного года0,2% -1%2-10
от 2 летнего – до 6 летнего возраста0,2% -0,7%2-7
от 6 летнего – до 12 летнего возраста0,2% -1,3%2-13
старше 12 лет (мальчики)0,24% – 1,7%2,4 -17
старше 12 лет (девочки)0,12% – 2,05%1,2 – 20,5

В каких случаях назначают диагностику крови?

Анализ на ретикулоциты назначают в случаях:

  • При контроле лечения заболевания анемии и применения препаратов (содержащие железо и медикаменты, в состав которых входит фолиевая кислота и витамин группы В12;)
  • При оперативном вмешательстве и трансплантации костного мозга;
  • Если существует подозрение на разрушение клеток эритроцитов;
  • Для контроля эффективности терапии системы кроветворения;
  • После потери большого объема крови;
  • Кровотечение во внутренних жизненно важных органах;
  • При лечении укуса ядовитой змеи и болезни малярия;
  • При трансплантации органа почки;
  • Контроль над приемом медикаментозного препарата эритропоэтин;
  • При онкологических заболеваниях;
  • Метастазы в клетках костного мозга онкольного.

Как проходит диагностическое исследование?

Анализ на наличие ретикулоцитов не является специальным исследованием крови, а входит в общий анализ крови.

Только если появилась острая необходимость провести специализированное исследование состава крови на ретикулоциты, тогда проводится дополнительная диагностика.

Суть этого метода диагностики заключается в том, чтобы выявить клетки, имеющие зернистую субстанцию и которая окрашивается при помощи специальных красителей.

Определяется данная субстанция по мазку крови. Для проведения этого анализа кровь берется из пальца.

Существует несколько способов проведения исследования:

  • На лабораторном стекле;
  • В лабораторной пробирке.

Способ анализа, на стекле широко применяемый метод в лабораториях Инвитро, хотя и этот метод не достаточно точный.

Для данного анализа необходимо применять специальный краситель, лабораторное стекло, микроскоп. Этот способ проверки наименее затратный и наиболее доступный метод.

Стекло необходимо вымыть и хорошо высушить при использовании горелки.

На теплую поверхность нужно нанести краситель и сделать из него мазок на стекле. После этого нанести каплю крови на этом мазке и также сделать из нее мазок.

Поместить стекло с мазком на 10 минут во влажную среду, а после этого просушить на воздухе.

Способ исследования в пробирке. Эта методика немного отличается от методики анализа на стекле. Суть данной методики в том, что необходимо в пробирку поместить краситель, а потом в нее добавить каплю крови и перемешать. Этот состав должен постоять от 20 минут до 180 минут. После этого повторно перемешать и только после этого наносить мазки.

Также проводится диагностика методом автоматизированного анализа. Данная методика намного сложнее, чем предыдущая методика, но она позволяет более точно исследовать кровь.

Для этой методики применяется только венозная кровь и не позднее, чем через 10 часов после забора.

По данному способу выясняют ретикулоциты низкой флюоресценции — LFR, средней — MFR и сильной флюоресценции — HFR.

Подсчет уровня ретикулоцитов в составе крови

Мазки, которые прошли всю процедуру высушивания, исследуют при помощи микроскопа. Эритроциты так же как и ретикулоциты имеют зернистую структуру.

Окраска эритроцитов:

  • Желтого цвета и зеленоватого оттенка;
  • Ретикулоциты имеют синий цвет и фиолетовый или розовый оттенок.

Подсчет количества клеток считается в промилле или же в процентном соотношении к 1000 эритроцитам. Если в мазке крови выявлены ретикулы в количестве 17 клеток, тогда подсчет такой — это 17 промилле или же 1,7%.

Готовые мазки исследуют под микроскопом. Эритроциты и ретикулоциты имеют желтовато-зеленоватую окраску, зернистая структура ретикулоцитов синего или синевато-фиолетового цвета. Посчитанные клетки выражают в промилле или в процентах.

Целесообразно при заболевании анемия применять «ретикулоцитарный индекс продукции», в котором указывается гематокрит и число суток, для того чтобы ретикулоциты поступили в кровь.

Повышенный уровень ретикулоцитов в крови что это значит?

У новорожденного ребенка ретикулоциты повышены и соответствует 5% — 10%. Этот коэффициент является нормой для такого возраста ребенка и это связано с тем, что малыш адаптируется к влиянию внешней среды.

По мере взросления у детей показатель снижается до нормативного соответствия.

У взрослых повышение ретикулоцитов происходит вследствие заболевания — ретикулоцитоз. Этот процесс происходит от того, что в крови присутствует недостаток эритроцитов и костный мозг восполняет эти клетки выработкой ретикулоцитов, которые не позднее, чем через 48 часов синтезируются в эритроциты.

Если человек здоров, тогда эритроциты в его крови живут 120 календарных дней, что позволяет костному мозгу своевременно пополнять их уровень.

Повышенные ретикулоциты в составе крови могут иметь, как позитивное влияние на организм, так и негативное влияние на человека.

Позитивное влияниеНегативное влияние
Повышение количества ретикулоцитов происходит в период 6 – 8 календарных дней при действенной терапии заболевания анемия.Если у человека есть ряд серьезных заболеваний (например, тиф), тогда высокий коэффициент ретикулоцитов может свидетельствовать о кровотечении во внутренних органах.
Выше нормы уровень ретикулоцитов в срок 3 – 4 календарных дня после большого объема потери крови свидетельствует о восстановлении показателей крови.Ретикулоцитоз, который часто называют ложным (это состояние, когда ретикулы выше нормы в крови, но в костном мозге не происходит их увеличение), говорит о том, что в костном мозге присутствует воспалительный процесс или метастазы у онкологических больных.
Увеличение имеет место при химиотерапии и лучевой терапии онкологических больных, в случае положительной динамике лечения.
Также повышение связано с периодом беременности. Это означает, что организм женщины самостоятельно справляется с большей потребностью в кислороде.

Последствия высокого коэффициента RET: увеличенный гематокрит, а также кровь стает густой и вязкой. Что в большинстве случаев приводит к инфарктам миокарда, инсультам, тромбозам и тромбоэмболии артерии легких. Достаточно часто происходит отмирание тканей и клеток на нижних конечностях.

Повышенный уровень ретикулоцитов — это состояние крови, которое очень опасно для здоровья человека и требует срочного медикаментозного лечения.

От чего происходит понижение уровня ретикулоцитов?

Пониженная степень RTC или отсутствие ретикулоцитов — это когда в крови коэффициент ретикулоцитов низкий и в костном мозге тоже, такое состояние организма называется ретикулоцитопенией.

Снижены выработки ретикулоцитов показывают нарушения в синтезе эритроцитов, что провоцирует угнетение работоспособности костного мозга.

При данном заболевании пациент не получает должного количества кислорода в кровь.

В обозначении анализа крови, пониженный уровень RTC вызывает опасение за здоровье человека. Необходимо провести обследование в целях выяснить причины такого снижения функциональности костного мозга.

Причины:

  • Патология в составе крови — анемия;
  • При заболевании почек;
  • Метастазы в костном мозге при онкологии;
  • Алкоголизм.

При дефиците содержания в крови железа, а также нехватки витамина В12 в организме понижены ретикулоциты. При патологии почек происходит не значительное понижение степени данных клеток.

При алкоголизме происходит разложение клеток костного мозга и нарушение в составе крови под влиянием этилового спирта.

При онкологическом заболевании снижение ретикул происходит только в случае распространения метастаз в клетки костного мозга.

В момент проведения диагностического обследования показатель ретикулоцитов исследуют только по степени отклонения от нормы. В случае надобности врач назначает дополнительное лабораторное исследование.

При терапии широкого ряда патологий, таких как:

  • Онкологические заболевания;
  • Терапия патологии крови — анемия;
  • Лечение почек;
  • Малярия.

Повышение коэффициента ретикулоцитов указывает на эффективность лечебных процедур и на прием медикаментозных средств. При медикаментозном и комплексном лечении заболевания крови анемии, необходимо контролировать ретикулоцитарный криз.

При анемии фракция незрелых ретикулоцитов значительно понижена, и ее уровень обозначается — IRF.

Молекулы ретикулоцитов в период беременности

У женщин в период вынашивания ребенка, наблюдается повышение содержания уровня ретикулоцитов. Данные показатели этого уровня характерны для этого периода и принято считать нормой.

Это происходит вследствие того, что у женщины в этот период происходит увеличение общего объема крови за счет плазмы.

Идеальная беременность протекает без увеличения коэффициента ретикулоцитов и содержания их в норме.

У беременных женщин из-за увеличения объема, кровь становится жидкой и с пониженным содержанием в ней гемоглобина.

Процесс кроветворения запущен и активен. По этой причине незначительное отклонение от нормы в сторону увеличения допустимый показатель. Это скорее говорит об адаптации организма к состоянию беременности, чем о патологии крови.

Источник: https://moyakrov.info/blood/retikulotsity

Подсчет ретикулоцитов в мазке после окраски их специальными красителями

Исследование ретикулоцитов

Подсчет ретикулоцитов в мазке после окраски их специальными красителями является на практике наиболее используемым методом подсчета количества ретикулоцитов. Это связано с тем, что метод простой, достаточно дешевый и не требует специального дорогостоящего оборудования, в связи с чем может применяться в любой клинико-диагностической лаборатории.

см. также статьи Ретикулоциты и Подсчет количества ретикулоцитов при помощи люминесцентной микроскопии

Принцип метода

Выявление зернисто-сетчатой субстанции ретикулоцитов при суправитальной окраске щелочными красками с дальнейшим подсчетом их в мазке крови.

Можно использовать один из следующих красителей:

  1. Насыщенный раствор бриллиантового крезилового синего в абсолютном спирте (для приготовления абсолютного спирта надо выдержать 96% этанол в нескольких сменах прокаленного порошка медного купороса). На 100 мл абсолютного спирта берут 1,2 г краски.
  2. Раствор азура I: азур I – 1 г, аммония оксалат – 0,4 г, натрия хлорид – 0,8 г, этиловый спирт 96% – 10 мл, дистиллированная вода – 90 мл. Раствор краски в закрытом флаконе помещают на 2 – 3 дня в термостат при 37° C и периодически энергично взбалтывают. Затем охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр. Раствор сохраняют в посуде из темного стекла. При появлении осадка краску следует снова профильтровать.
  3. Раствор азура II: азур II – 1 г, натрия цитрат – 5 г, натрия хлорид – 0,4 г, дистиллированная вода – 45 мл. Раствор оставляют в термостат при 37° C на 2 суток, периодически помешивая. Для ускорения растворения краску можно прогреть на слабом огне в течение 15 – 20 мин, не доводя до кипения. Охлаждают до комнатной температуры и фильтруют. Хранят в посуде из темного стекла.

Микроскоп.

Окраску ретикулоцитов проводят либо на стекле, либо в пробирке.

При окраске ретикулоцитов на стекле хорошо вымытое и обезжиренное предметное стекло подогревают над пламенем горелки. Стеклянной палочкой наносят на стекло каплю одного из перечисленных выше красителей и готовят мазок из краски шлифованным стеклом. Стеклографом маркируют сторону стекла, на которую нанесен мазок краски.

В таком виде стекла можно заготовить впрок и хранить в сухом темном месте. Перед проведением анализа готовят влажную камеру. Обычно для этого пользуются чашкой Петри с уложенными по краям валиками смоченной ваты или фильтровальной бумаги. Наносят каплю крови на мазок краски, готовят из нее тонкий мазок и тотчас помещают во влажную камеру на 3 – 10 мин.

Затем высушивают мазки на воздухе.

Окраска ретикулоцитов в пробирке отличается при использовании разных красителей.

Метод 1 – окраска ретикулоцитов в пробирке бриллиантовым крезиловым синим

Перед употреблением готовят в пробирке рабочий раствор бриллиантового крезилового синего из расчета на каплю 1% раствора оксалата калия 4 капли раствора краски бриллиантового крезилового синего. В краску добавляют 0,04 мл крови (две пипетки до метки 0,02). Смесь тщательно, но осторожно перемешивают и оставляют на 30 минут. Затем снова перемешивают и готовят тонкие мазки.

Метод 2 – окраска ретикулоцитов в пробирке азуром II

В пробирку помещают 0,05 мл раствора краски азур II и 0,2 мл крови. Смесь тщательно перемешивают и оставляют на 20 – 30 минут. Снова перемешивают и готовят тонкие мазки.

Метод 3 – окраска ретикулоцитов в пробирке азуром I

В пробирку помещают 0,3 – 0,5 мл раствора краски азур I и 5 – 6 капель крови пипеткой от аппарата Панченкова. Пробирку закрывают резиновой пробкой, смесь тщательно, но осторожно перемешивают и оставляют на 1 – 1,5 часа (ретикулоциты окрашиваются лучше при экспозиции 1,5 – 3 часа). Перемешивают и готовят тонкие мазки.

В настоящее время в продаже имеются готовые красители для ретикулоцитов заводского изготовления. Окраска ретикулоцитов с их помощью производится согласно прилагаемой инструкции.

Приготовленные одним из указанных выше способов мазки микроскопируют с иммерсионным объективом. В мазке ретикулоциты и эритроциты окрашены в желтовато-зеленоватый цвет, зернисто-нитчатая субстанция в ретикулоцитах – в синий (при окраске азуром II и бриллиантовым крезиловым синим) или синевато-фиолетовый цвет (при окраске азуром I).

Фотографии ретикулоцитов:

Окраска ретикулоцитов
Ретикулоциты
Ретикулоциты
Ретикулоциты
Reticulocytes

Находят поля зрения, где эритроциты располагаются раздельно. В этих полях зрения необходимо подсчитать не менее 1000 эритроцитов и отметить среди них количество эритроцитов, содержащих зернисто-нитчатую субстанцию. Большая точность получается при подсчете на 2000 – 3000 эритроцитов.

В связи с тем, что в поле зрения располагается большое количество эритроцитов, что затрудняет подсчет, необходимо ограничить (уменьшить) поле зрения.

Для этого можно воспользоваться либо специальным окуляром, в котором можно уменьшить поле зрения до требуемых размеров, либо воспользоваться специальным «окошком» (из бумаги вырезают круг диаметром несколько меньше окуляра, в центре круга вырезают небольшой ромбик и вставляют полученное окошко в окуляр).

Количество подсчитанных ретикулоцитов выражают на 100 (в процентах) или на 1000 (в промилле) эритроцитов.

Пример: При подсчете в мазке 1000 эритроцитов выявлено, что 15 эритроцитов из 1000 имеют зернисто-сетчатую субстанцию той или иной степени, то есть являются ретикулоцитами. Следовательно, количество ретикулоцитов в данном случае составляет 1,5% или 15‰.

Клиническое значение определения количества ретикулоцитов.

  • Справочник “Лабораторные методы исследования в клинике” под редакцией Меньшикова В. В. – Москва, “Медицина”, 1987 г
  • Любина А. Я., Ильичева Л. П. и соавторы – “Клинические лабораторные исследования” – Москва, “Медицина”, 1984 г.

Метод подсчета количества ретикулоцитов при помощи люминесцентной микроскопии отличается простотой и требует немного времени, более точен по сравнению с обычным методом, так как при люминесцентной микроскопии обнаруживаются мельчайшие зерна сетчато-нитчатого вещества.

Раздел: Гемоцитология

Читать

Ретикулоциты – молодые эритроциты, образующиеся после потери нормобластами ядер. Характерной особенностью ретикулоцитов является наличие в их цитоплазме зернисто-нитчатой субстанции (ретикулума), представляющей агрегированные рибосомы и митохондрии.

Раздел: Гемоцитология

Читать

Тельца Жолли (тельца Хауэлла-Жолли) – мелкие круглые фиолетово-красные включения размером 1 – 2 мкм, встречаются по 1 (реже по 2 – 3) в одном эритроците. Предсталяют собой остаток ядра после удаления его РЭС. Выявляются при интенсивном гемолизе и “прегрузке” РЭС, после спленэктомии, при мегалобластной анемии..

Раздел: Гемоцитология

Читать

Цитохимическое исследование липидов основано на применении красящих веществ, растворяющихся в жирах (судан III, судан IV, черный судан и др.). Для выявления нейтрального жира пользуются суданом III, окрашивающим жир в оранжевый цвет. Липоиды выявляются лучше суданом черным (черное окрашивание).

Раздел: Цитохимия

Читать

Метод Нечипоренко в отечественной лабораторной диагностике является наиболее распространенным методом количественного определения форменных элементов в моче.

Этот метод наиболее прост, доступен любой лаборатории и удобен в амбулаторной практике, а также имеет ряд преимуществ перед другими известными количественными методами исследования осадка мочи.

По методу Нечипоренко определяют количество форменных элементов (эритроцитов, лейкоцитов и цилиндров) в 1 мл мочи.

Раздел: Анализ мочи

Читать

Источник: http://www.clinlab.info/Hemocytology/Reticulocytes-counting-49

Ретикулоциты: что это, нормы у взрослых и детей, причины нарушений

Исследование ретикулоцитов

   Ретикулоциты в крови составляют небольшое количество, однако они важны тем, что из них образуются эритроциты.

Уровень ретикулоцитов в периферической крови является прямым отражением регенераторных возможностей костного мозга.

Снижение показателя ретикулоцитов (RET) носит название ретикулоцитопении и выявляется при сдвигах в костном мозге апластического или гипопластического характера.

Ретикулоцитоз в анализе, напротив, будет свидетельствовать о том, что у пациента происходит усиленная выработка эритроцитов (в такой ситуации ретикулоциты в крови будут повышены). Повышение уровня ретикулоцитов может свидетельствовать, например, о кровопотере (особенно это важно для внутренних кровопотерь, которые не видны при осмотре).

эритроцитов

В норме, ретикулоциты в определенном количестве выявляются и в крови, и в костном мозге. Их число служит прямым отображением качества эритропоэза (образования эритроцитов).

Справочно. Будучи юными предшественниками зрелых эритроцитарных клеток, после образования в костном мозге и выхода в кровь, они находятся в ней около двух суток, трансформируясь в зрелые формы. Процесс их созревания происходит под контролем эритропоэтина (гормон, вырабатываемый почками). Часть ретикулоцитов превращается в эритроциты прямо в костном мозге (КМ).

   RET способны выполнять ту же функцию, что и эритроцитарные клетки – доставлять кислород к органам и тканям. Однако они не могут полноценно замещать зрелые формы. По сути, активная выработка ретикулоцитов – это ответ костного мозга на дефицит эритроцитарной массы и потребность тканей в кислороде.

При гемолитических анемиях, число ретикулоцитов в крови может превышать 60%, а иногда и полностью замещать зрелые формы, так как все эритроциты разрушаются. При резком усилении эритропоэза, в анализе крови будут обнаруживаться также и нормобласты (клетки, трансформирующиеся в ретикулоциты).

При железодефицитной анемии, во время лечения железосодержащими препаратами, ретикулоциты повышены в норме. Подобный ретикулоцитоз свидетельствует о нормальной регенераторной способности КМ и адекватном лечении, не требующем коррекции. Это связано с тем, что ретикулоциты в крови повышаются раньше эритроцитов (так как являются их предшественниками).

То есть основная функция ретикулоцитов заключается в восполнении дефицита эритроцитарной массы.

Внимание! Уменьшения количества ретикулоцитов может свидетельствовать об истощении регенераторных способностей, либо о поражении КМ.

Ретикулоциты в анализе крови подсчитываются при:

  • диагностике нарушений гемопоэза;
  • подозрении на гемолиз;
  • малярии;
  • укусах ядовитых пауков и змей;
  • подозрении на скрытое (внутреннее) кровотечение;
  • онкологических новообразованиях;
  • мониторинге продукции эритропоэтина у больных после трансплантации почки;
  • выявлении уменьшенного или увеличенного количества эритроцитов;
  • мониторинге регенераторной способности костного мозга после его пересадки;
  • оценивании реакции пациента на проводимую терапию (лечение препаратами ферума, эритропоэтина, фолиевой кислоты, витамина B12);
  • диагностике качества лечения препаратами эритросупрессоров.

Внимание. Также ретикулоциты подсчитываются у беременных. В норме, умеренное увеличение этих клеток говорит о хорошей адаптации организма женщины. Это связано с тем, что для беременных характерно быстрое «наращивание» общего объема циркулирующей крови, однако это происходит за счет увеличения плазменных элементов.

Кровь становится более жидкой, за счет снижения количества клеточных элементов по отношению к увеличенному объему плазмы. Умеренное увеличение количества ретикулоцитов является ответом организма женщины на развившуюся анемию.

Проведение и расшифровка анализа

   Важно помнить, что первый подсчет количества ретикулоцитов должен проводиться до начала приема препаратов, стимулирующих их образование.

Забор крови для подсчета количества ретикулоцитов необходимо проводить утром, на голодный желудок. Допускается употребление воды.

За сутки до исследования рекомендовано ограничить физические нагрузки и исключить эмоциональное перенапряжение. Прием алкоголя желательно исключить за неделю (если анализ проводится планово).

При трактовке результатов необходимо помнить о том, что некоторые медикаменты способны изменять показатель ретикулоцитов.

Ретикулоциты будут уменьшены у пациентов, принимающих:

  • цитостатики;
  • некоторые антибиотики (сульфаниламиды, хлорамфеникол);
  • противоэпилептические препараты (карбамазепин);
  • противопаркинсонические средства;
  • иммунодепрессанты.

Справочно. Увеличение уровня ретикулоцитов диагностируется при употреблении препаратов эритропоэтина, B12 и фолиевой кислоты, феррума, а также нестероидных противовоспалительных средств.

У новорожденных малышей ретикулоциты повышены в норме.

До двух дней жизни норма ретикулоцитов составляет от тридцати до семидесяти.

С двух до шести дней – от 10-ти до 30-ти.

С шести до восьми дней – от нуля до десяти.

С восьми дней до пяти недель – от 2-х до 20-ти.

С пяти до семи недель – от 3-х до 35-ти.

С 7-ми до 10-ти недель – от 4-х до 48-ми.

С 10-ти до 12-ти недель – от 3-х до 42-х.

С 12-ти до 15-ти недель – от 3-х до 36-ти.

С пятнадцати недель до года – от двух до 28-ми.

От года до шести лет – от двух до семи;

От шести до 12-ти лет – от двух до 13-ти.

Далее, наблюдаются незначительные половые различия в показателях. Ретикулоциты норма:

  • у мужчин – от 5.1 до 18.1;
  • у женщин – от 5-ти до 20-ти.

Некоторые авторы приводят данные норм ретикулоцитов, которые имеют небольшое отличие от приведенных. Вот для примера еще одна таблица, с которой можно познакомиться.

Почему ретикулоциты в крови могут повышаться

  • гемолитические анемии (может наблюдаться увеличение количества ретикулоцитов, вплоть до 3000/00;
  • острые кровопотери;
  • токсический гемолиз (укусы ядовитых змей или пауков, прием медикаментов, токсичных для эритроцитов);
  • заболевания крови (полицитемия, талассемия);
  • малярия;
  • беременность (умеренно компенсаторное увеличение);
  • переезд в высокогорные районы (естественная адаптация);
  • метастазирование отдаленных злокачественных новообразований в костный мозг;
  • тяжелая гипоксия (кислородное голодание органов и тканей);
  • лечение различных анемий препаратами ферума, B12 и фолиевой кислоты;
  • назначение препаратов эритропоэтина.

Также, следует учитывать, что ретикулоцитоз может быть:

  1. истинный (главный маркер регенераторной способности КМ. Отличается увеличением количества ретикулоцитарных клеток как в костном мозге, так и в общем кровотоке;
     
  2. ложный (сопровождается выбросом ретикулоцитов в периферическую кровь и дальнейшим истощением их запасов в костном мозге). Такая картина характерна для поражения костного мозга.

Пониженные ретикулоциты. Причины

Уменьшение количества ретикулоцитов происходит при: 

  • апластических и гипопластических анемиях;
  • истощении регенераторной способности костного мозга;
  • В12 дефицитной анемии;
  • первичном поражении опухолью непосредственно костного мозга или при его вторичном метастатическом поражении;
  • аутоиммунных заболеваниях, сопровождающихся поражением кроветворной системы;
  • микседеме;
  • заболеваниях почек (снижается выработка эритропоэтина);
  • приеме лекарственных средств, угнетающих костномозговое кроветворение;
  • алкоголизме.

У лиц, злоупотребляющих крепкими спиртными напитками, снижение числа ретикулоцитов происходит по нескольким причинам. Во-первых, происходит угнетение кроветворной функции костного мозга. Во-вторых, подавляется выработка эритропоэтина почками. В-третьих, токсическое воздействие продуктов распада алкоголя способствует разрушению циркулирующих в крови ретикулоцитов, усиливая ретикулоцитопению.

Внимание. Уменьшение количества ретикулоцитов наблюдается у пациентов, принимающих цитостатики, а также только что прошедших курс химиотерапии и лучевой терапии.

Это происходит в результате угнетения выработки стволовых клеток кроветворения в костном мозге.

Однако, через неделю после химио- или лучевой терапии, начинается восстановительный период, в норме сопровождающийся увеличением числа ретикулоцитов.

Уровень предшественников эритроцитов имеет высокую ценность в диагностике заболеваний костного мозга, почек, анемий (также он позволяет оценить эффективность назначенного лечения), злокачественных образований и т.д.

Важно. Необходимо понимать, что на основании только уровня ретикулоцитов, поставить диагноз и назначить дальнейшее лечение невозможно. Этот показатель должен рассматриваться в контексте других результатов исследований, жалоб больного и результатов осмотр.

Источник: http://serdcet.ru/retikulocity.html

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.